理化性質(zhì)
吸收波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng):506nm /526nm(低/高鈣)
保存與使用:粉狀的FLUO-3AM應(yīng)保存于-20度以上。建議使用DMSO作為溶媒。在溶解前,F(xiàn)LUO-3AM和DMSO均須放置至室溫。溶解過(guò)程可能會(huì)比較慢。用無(wú)水的DMSO溶解的FLUO-3AM長(zhǎng)期保存,應(yīng)嚴(yán)格密封,并保存于-20度。使用前,將保存液放置至室溫后再打開??杀苊釧M探針在長(zhǎng)期的保存過(guò)程中水解。
工作原理
鈣離子熒光探針Fluo4廣泛用于長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光鈣指示劑。其在506NM處被吸收,可以被氬離子激光的488nm激發(fā)光激發(fā),便于檢測(cè)。FLUO-3在沒(méi) 有同鈣結(jié)合的情況下,無(wú)熒光產(chǎn)生。但是,在與鈣結(jié)合后,熒光(526nm)增強(qiáng)至少40倍。Fluo-3 AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM的熒光非常弱,其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。Fluo-3 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,激發(fā)波長(zhǎng)為506nm,發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右,發(fā)射波長(zhǎng)為525-530nm。
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