鬼筆環(huán)肽Phalloidin生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次,每次10分鐘;
3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;
加入5ug/ml的FITC-鬼筆環(huán)肽室溫染色30-60分鐘,夏季時間可以短一些,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;
DAPI或hoechst33258染細(xì)胞核10分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;
吸去多余水分,加熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),蓋上蓋玻片,熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。
注意事項
鬼筆環(huán)肽Phalloidin的分子量小,很容易通過細(xì)胞,不需要對細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。
藥品價格昂貴,0.1mg的售價接近兩千元,要節(jié)約使用。
毒性較大,戴上手套操作。
尊敬的客戶:
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