一、細(xì)胞代謝概述
細(xì)胞代謝的特征是細(xì)胞內(nèi)發(fā)生變化的總和,通過這些變化,能量與成分被用于各種生化過程。細(xì)胞呼吸是細(xì)胞新陳代謝的一種功能,它分解糖和其他單糖,并通過化學(xué)方式利用產(chǎn)生的ATP來產(chǎn)生能量。
細(xì)胞呼吸主要涉及三個(gè)步驟:糖酵解、檸檬酸循環(huán)和氧化磷酸化。這些過程共同形成各種構(gòu)建快,用于創(chuàng)建許多必須分子,包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和碳水化合物。廢物的處理是細(xì)胞新陳代謝的一項(xiàng)重要功能,可以功能性地排泄?jié)撛谟卸境煞郑ê衔?、磷酸鹽和硫酸鹽。由于細(xì)胞代謝與許多已知的生物途徑(氨基酸代謝和運(yùn)輸、尿素循環(huán)、碳水化合物耐受性、糖原儲(chǔ)存、脂肪酸氧化和線粒體活性等)相關(guān),因此了解其在細(xì)胞生理學(xué)中的作用的重要性、病癥病理學(xué)和病因?qū)W不應(yīng)被低估。
圖1.TCA循環(huán)及其在脂質(zhì)代謝中的作用概述。
二、方法與分析
常見的檢測和評(píng)估細(xì)胞代謝活動(dòng)的技術(shù)之一是通過比色法或熒光法測定。這些測定針對(duì)已知相關(guān)途徑的特定分析物,例如在鑒定糖酵解途徑時(shí)可以選擇檢測葡萄糖、己糖激酶、丙酮酸、丙酮酸激酶,乳酸和糖原。在脂肪酸代謝中,甘油三酯、游離脂肪酸和焦磷酸鹽可能是靶標(biāo)。此外,在觀察尿素代謝時(shí)可以選擇尿素、谷氨酸或L-精氨酸,并且ATP,NAD,NADH,NADP或NADPH(或其組合)可以針對(duì)總體代謝活性。這些檢測方法可以作為試劑盒在市場上買到,雖然每種方法的技術(shù)規(guī)格略有不同,但是每種方法的許多步驟是相似的。
表一.用于測量ATP活性、形成或消耗的生化測定。
表二.NAD/NADH和NADP/NADPH檢測比較